Palazzo Barberini werd gebouwd door Will of Maffeo Barberini, de toekomstige paus Urban de achtste (1623-44).Het werd ontworpen door Carlo Maderno en gebouwd op de reeds bestaande villa Sforza.Bij de dood van Maderno werd het toezicht op de werken toegewezen aan Gian Lorenzo Bernini, die de veranda, de Greatsquare-Well Staircase, de Central Hall en de aangrenzende Elliptic Hall ontwierp.Francesco Borromini werkte ook in de werken mee en realiseerde de helicoïdale trap met tweelingkolommen.

The Vault of the Great Hall van Bernini werd frescoed door Pietro da Cortona die het allegorische thema van de triomf van de goddelijke voorzienigheid vertegenwoordigt, om de familie Barberini te vieren.In 1949 werd het paleis door de staat gekocht om de nieuwe locatie van de National Gallery of Ancient Art te worden.

De schilderijen in de collectie zijn ongeveer 1445 en komen voornamelijk uit de fusies van collecties van Romeinse nobele families (Torlonia, Chigi, Sciarra en Barberini).De werken zijn van de Toscaanse, Romeinse, Napolitaanse, Venetiaanse, Franse en Vlaamse scholen en bestrijken de tijdspanne van de twaalfde tot de achttiende eeuw.Major authors include Filippo Lippi (Madonna on the throne with the Infant), Raphael (La Fornarina), El Greco (Baptism of Christ), Tintoretto (Christ and the adulteress), Titian (Venus and Adonis), Guercino (Scourging of Christ), Caravaggio (Judith onthoofding Holofernes, Narcisus), Mattia Preti (de opstanding van Lazarus) en Guido Reni (Magdalene berouw).Objecten die afkomstig zijn uit het voormalige industriële artistieke museum, ontmanteld tijdens de Tweede Wereldoorlog, worden ook tentoongesteld, waaronder opmerkelijke collecties van glas, majolicas en stoffen.