Palazzo Barberini wurde von Willen von Maffeo Barberini, dem zukünftigen Papst Urban the Eight (1623-44), erbaut. Es wurde von Carlo Maderno entworfen und auf der bereits bestehenden Villa Sforza errichtet. Bei Madernos Tod wurde Gian Lorenzo Bernini, der die Veranda, das große Treppenhaus, die zentrale Halle und die angrenzende elliptische Halle entwarf, mit der Überwachung der Arbeiten beauftragt. Francesco Borromini arbeitete auch an den Arbeiten mit und realisierte die Wendeltreppe mit zwei Säulen.

Das Gewölbe des großen Saales von Bernini wurde von Pietro da Cortona mit Fresken bemalt, die das allegorische Thema des Triumphs der göttlichen Vorsehung darstellen, um die Barberini-Familie zu feiern. Im Jahr 1949 wurde der Palast vom Staat gekauft, um der neue Standort der National Gallery of Ancient Art zu werden.

Die Gemälde in der Sammlung stammen aus dem Jahr 1445 und stammen hauptsächlich aus der Verschmelzung von Sammlungen römischer Adelsfamilien (Torlonia, Chigi, Sciarra und Barberini). Die Werke stammen aus der toskanischen, römischen, neapolitanischen, venezianischen, französischen und flämischen Schule und decken die Zeitspanne vom 12. bis zum 18. Jahrhundert ab. Wichtige Autoren sind Filippo Lippi (Madonna auf dem Thron mit dem Säugling), Raffael (La Fornarina), El Greco (Taufe Christi), Tintoretto (Christus und die Ehebrecherin), Tizian (Venus und Adonis), Guercino (Scourging of Christ). Caravaggio (Judith enthauptet Holofernes, Narcisus), Mattia Preti (Auferstehung des Lazarus) und Guido Reni (Magdalena reuige). Zu sehen sind auch Objekte aus dem ehemaligen Industrial Artistic Museum, die während des Zweiten Weltkriegs demontiert wurden, darunter bemerkenswerte Sammlungen von Gläsern, Majoliken und Stoffen.